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• 1、酵母菌破碎方法

酵母菌破碎方法

1、具體步驟如下：采用低滲條件處理酵母菌細胞，使細胞內(nèi)外滲透壓相差不大，避免胞壁破裂。通過離心或過濾等方法將酵母細胞分離出來。對分離出來的酵母細胞進行機械破碎，可以使用高速離心、均質(zhì)器或超高壓等方法。對破碎后的細胞進行離心，在低滲條件下去除細胞壁和組織殘留物。

2、需要。在酵母菌超聲破碎實驗中，必須要加入其它的成分才能進行細胞裂解，操作如下：用酵母細胞裂解液重懸酵母菌。加酚－氯仿稀釋。加玻璃珠促進分解。振蕩半小時。加入乙醇使細胞沉淀。電轉(zhuǎn)大腸桿菌，細胞破裂。

3、①酸堿水解法破壁。在酵母菌體中添加酸或堿后加水分解法，常用的酸、堿為鹽酸、硫酸、NaOH等，這種方法價格低廉，氨基酸收率高，但是水解后的產(chǎn)品微量營養(yǎng)成份損失大，口味差，色澤不好，特別是對于食品的安全要求越來越高的今天，這種方法逐漸淘汰。② 機械破壞法。

4、高剪切均質(zhì)機主要是由于了轉(zhuǎn)子高速運轉(zhuǎn)所產(chǎn)生的高速線速度，還有頻率的機械的效應(yīng)，伴隨著強勁的動能，讓組織或細胞可以在定子、轉(zhuǎn)子之間非常狹窄的空隙之中受到了非常的強烈的機械還有液力的剪切、液層的摩擦、離心的擠壓、撞擊的撕裂還有湍流等多種綜合性的效果，造成細胞破碎。

5、酵母菌適用于高壓勻漿破碎技術(shù) 植物葉片適用于撞擊破碎法。紅血球細胞適用于滲透壓沖擊破碎法。動物內(nèi)臟適用于低溫玻璃化破碎法。

6、本方法采用蝸牛酶處理去除釀酒酵母細胞壁。去壁后的釀酒酵母細胞用SDS溶液處理，使細胞破裂，并使蛋白質(zhì)變性，釋放基因組DNA，再利用乙酸鉀溶液低溫處理，使基因組DNA充分復(fù)性，溶解于水，最終通過乙醇沉淀獲得基因組DNA。這一方法避免使用酚和氯仿等有機溶劑，操作更為簡單，安全。

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